細胞培養(yǎng)箱是開展免疫學,、腫瘤學,、遺傳學及生物工程所必須的關(guān)鍵設(shè)備,細胞培養(yǎng)箱廣泛應用于細胞,、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),,常見于細胞動力學研究、哺乳動物細胞分泌物的收集,、各種物理,、化學因素的致癌或毒理效應、抗原的研究和生產(chǎn),、培養(yǎng)雜交瘤細胞生產(chǎn)抗體,、體外授精(IVF)、干細胞,、組織工程,、藥物篩選等研究領(lǐng)域,。
細胞培養(yǎng)箱的污染來源
對于細胞來說,,非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,,培養(yǎng)箱本身是不會辨別的,而細胞培養(yǎng)中大部分時間里細胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),,因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌非常關(guān)鍵!
細胞培養(yǎng)箱中的主要污染源:細菌,、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒,、支原體,、非同種細胞。
支原體:支原體污染后,,因為它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存,,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,細胞無明顯變化,,外觀上給人以正常感覺,,實則細胞已經(jīng)受到多方面潛在影響,如引起細胞變形,,影響DNA合成,,抑制細胞生長等,往往被大多數(shù)實驗者忽視,。
細菌:細菌污染后,,培養(yǎng)基1-2天就會變色,對細胞生長影響明顯,,應迅速將污染細胞與其它細胞系隔離,,滅菌后丟棄,還要用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,。
病毒:由于病毒寄生生存,,爆發(fā)后盡快和正常細胞隔離,丟棄處理,,相對來說容易處理,,對操作者威脅較大;盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng),但生產(chǎn)疫苗是不安全的,。因此,,潛在病毒是細胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題,。
真菌(霉菌和酵母菌):真菌生長的比較慢,,不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了;目前沒有好的抑制方法,,包括現(xiàn)在常用的兩性霉素,,一旦污染容易反復爆發(fā),,尤其孢子很難殺滅。
非同種細胞:即細胞交叉污染,,由于細胞培養(yǎng)操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開,,往往會使一種細胞被另一種細胞污染。目前,,世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所污染,,致使許多實驗宣告無效。
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